Gloria Anzaldúa nace en el Valle del Río Grande, al sur de Texas, el 26 de septiembre de 1942. Sus padres son aparceros y peones de campo, es decir, trabajan tierras de las cuales no son dueños a cambio de una parte de las cosechas y pagos extremadamente bajos. A los 11 años, la escritora también comienza a trabajar en el campo. Dado que como familia de trabajadores migrantes tienen grandes dificultades para que Gloria y sus hermanos puedan recibir una buena educación, el padre decide que deben mudarse a un pequeño pueblo de Texas llamado Hargill. Viven allí hasta que tres anõs más tarde, cuando la autora tiene 14, el padre muere.
Tras la muerte del padre, la familia se encuentra en una situación económica desesperada, y la autora se ve forzada a trabajar en el campo nuevamente durante sus estudios secundarios. A pesar de ello, Anzaldúa logra dedicar su poco tiempo libre a variadas tareas creativas que le interesan. En 1969, termina su licenciatura, especializada en Inglés, Arte y Educación, y poco después se gradúa de una Maestría en Inglés y Educación. Tras obtener estos títulos, la autora comienza a trabajar como docente en una escuela bilingüe, primero, y como docente de educación especial, después.
En 1977, Anzaldúa se muda a California y comienza a desempeñarse como docente universitaria en varias instituciones, incluyendo la Universidad de San Francisco y la Universidad de California en Santa Cruz. Por estos años también trabaja de manera independiente como escritora y produce teoría crítica. En 1981 se publica el libro This Bridge Called My Back: Writings by Radical Women of Color, traducido al español como Esta puente, mi espalda. Voces de mujeres tercermundistas en los Estados Unidos, que Anzaldúa coedita junto a Cherrie Moraga. Se trata de una obra pionera y muy influyente, ya que propone un desafío contundente al feminismo blanco. Ambas editoras ganan reconocimiento gracias a esta publicación. Años más tarde, en 2002, Anzaldúa edita junto a AnaLouise Keating un volumen que le da continuidad, titulado This Bridge We Call Home: Radical Visions for Transformation.
Es en 1987 cuando se publica la obra más destacada de la autora, Borderlands/La Frontera: The New Mestiza, cuyo título en español es Borderlands/La Frontera: la nueva mestiza. Es a su vez autora de Light in the Dark/Luz en lo Oscuro: Rewriting Identity, Spirituality, Reality, un libro escrito para funcionar como su tesis doctoral, que, sin embargo, se publica de manera póstuma en 2015. A lo largo de estas décadas, además de estos estudios teóricos, Anzaldúa publica numerosos textos de ficción y poesía, así como varias novelas para niños.
Anzaldúa es una autora y teórica muy influyente, y una de las figuras fundacionales de las áreas de investigación llamadas Estudios Chicanos y Estudios Americanos. Ha recibido reconocimientos, tales como el Premio al Libro de la Funcación Before Colombus, en 1986, por This Bridge Called My Back. A su vez, Borderlands / La Frontera es considerado uno de los 38 libros principales de 1987 por la publicación académica Library Journal, y celebrado como uno de los mejores cien libros del siglo XX, tanto por Utne Reader como por Hungry Mind Review. La autora también es galardonada con el Lamda Lesbian Small Book Press Award, el National Endowment for the Arts Fiction Award y el Lesbian Rights Awards en 1991, el Sappho Award of Distinction en 1992, y el American Studies Association Lifetime Achievement Award, por su trayectoria, en 2001.
La escritora muere en su casa de Santa Cruz, California, en 2004. En ese momento, todavía trabaja para terminar su doctorado en literatura en la Universidad de California en Santa Cruz, título que finalmente se le otorga de manera póstuma en 2005. Hoy en día existen diversos premios creados en su honor, como el Gloria E. Anzaldúa Distinguished Lecture Award, destinado a profesores de la Universidad de California en Santa Cruz, y el Gloria E. Anzaldúa Poetry Prize, para escrituras poéticas. A su vez, se mantiene activa una organización fundada justo antes de su muerte, la Society for the Study of Gloria Anzaldúa, que organiza conferencias y estimula los estudios de tópicos como la raza, lo indígena, el género, la sexualidad y la clase.