Señor Utterson
El narrador del libro, Utterson, es un abogado de mediana edad, y un hombre al que todos los personajes le confían algo a lo largo de la novela. Como viejo amigo de Jekyll, reconoce sus cambios y los extraños sucesos de Jekyll y Hyde, y decide seguir investigando la relación entre los dos hombres. Es quizás el personaje más prudente, respetuoso y racional del libro y, por lo tanto, es significativo que veamos los crímenes de Hyde y la hipocresía de Jekyll a través de su perspectiva observadora, pero generalmente compasiva.
Richard Enfield
El primo del señor Utterson, un hombre más joven que, se asume, es ligeramente más atrevido que su respetable y tranquilo pariente. Si bien se supone inicialmente que Enfield jugará un rol importante en esta novela, ya que es el testigo del crimen inicial de Hyde, Enfield solo aparece en dos escenas. En ambas pasa junto a la misteriosa puerta de Hyde con el señor Utterson.
Doctor Lanyon
Un antiguo amigo y colega del doctor Jekyll. Diez años antes de los acontecimientos de la novela, Lanyon suspendió su amistad con el doctor Jekyll debido a un desacuerdo sobre ciertos esfuerzos científicos. Lanyon es muy respetado y racional, y valora la verdad y la bondad por encima de todo.
Doctor Henry Jekyll
Un prominente médico de mediana edad descrito como alto y guapo. También es extremadamente rico, con una fortuna de más de dos millones de dólares. Todos los que lo conocen lo describen como respetado y correcto. Sin embargo, a medida que la novela avanza, somos testigos sutiles de su comportamiento hipócrita, que, según Stevenson, es el defecto fatal de Jekyll. La creencia del médico de que dentro de cada ser humano existen fuerzas del bien y del mal lo conduce a experimentos que intentan separarlas. Aunque presentada como un experimento científico, Jekyll emprende esta tarea también para liberarse de su apariencia respetable. En el libro, la voz de Jekyll solo se escucha en el capítulo final, después de haber sido descrita a través de las lentes de Utterson, Lanyon, Poole y Enfield.
Edward Hyde
Un hombre pequeño, deforme y repugnante, algo más joven que el doctor Jekyll, que aparentemente carece de profesión. Lanyon, Utterson y Enfield todos describen haber presenciado algo indefinidamente malvado y horrible en la cara de Edward Hyde. A menudo se lo compara con animales, con la implicación de que Hyde no es un ser humano completamente evolucionado. A pesar de estas descripciones, Hyde es generalmente civilizado en sus interacciones con los demás, sobre todo con Utterson y Lanyon. El doctor Jekyll describe a Hyde como un "malvado", que amenaza a la sociedad por la noche, pisotea a una niña en la calle y asesina a Sir Danvers Carew. Al final de la historia nos enteramos de que Edward Hyde y el doctor Henry Jekyll son en realidad la misma persona.
Sir Danvers Carew
Un miembro muy respetado y prominente de la sociedad inglesa a quien Edward Hyde asesina brutalmente. Carew es descrito como "de pelo cano" y "guapo".
Señor Guest
El pasante de la oficina del Sr. Utterson que descubre la similitud entre la letra de la nota de Mr. Hyde y la del doctor Jekyll.
Richard Poole
El fiel mayordomo del doctor Jekyll. Cuando teme por la vida de su amo, Poole busca la ayuda del señor Utterson. Los dos hombres descubren a Edward Hyde muerto en el gabinete del doctor Jekyll y luego, a través de una carta escrita por Jekyll, se enteran de los fantásticos experimentos del médico.
