Narrador
Es el protagonista de la novela. Cuando comienza la obra, tiene catorce años y desconoce quiénes son sus padres. En el pueblo, algunos lo llaman “guacho” (p. 27), y adquiere "fama de vivaracho" (p. 30). Es locuaz, inquieto y detesta el encierro. La relación con sus tías, con quienes vive durante algunos años, empeora progresivamente. Cuando conoce a Don Segundo Sombra, se propone cambiar su vida y pronto comienza a instruirse junto a él en las tareas del oficio de resero. Luego de muchos años viajando con a él y otros reseros, recibe la noticia de que su padre, ya muerto, es Don Fabio Cáceres, que él lleva su mismo nombre, y que es dueño de una estancia que ha heredado.
Don Segundo Sombra
Es el tutor del protagonista durante la mayor parte de la novela, puesto que le enseña todos sus conocimientos para convertirse en gaucho. El protagonista lo llama "padrino". Es un hombre moreno y fuerte, de tez aindiada, ojos pequeños y levemente levantados hacia las sienes, coyunturas huesudas y pies cortos. Usa un flequillo a la altura de las cejas. Es oriundo de la localidad de San Pedro. Viste como un “gaucho pobre” (p. 36): una blusa corta, un chiripá largo, un pañuelo negro en el cuello, alpargatas y un rebenque tosco y sucio. Es hábil con el cuchillo y un excelente domador. Tiene un espíritu libre, anárquico y solitario. Es además un gran contador de historias.
Don Fabio Cáceres
Don Fabio Cáceres es el patrón de una estancia muy lujosa. Es amable, y el protagonista, durante su infancia, lo considera su protector. Hacia el final de la novela, cuando ya ha muerto, se revela que es el padre del protagonista.
Asunción y Mercedes
Son las tías del protagonista. El narrador vive en la casa de ellas durante una parte de su infancia. Ellas no le dan un buen trato, lo regañan diariamente, y lo obligan a rezar y a asistir a la iglesia. El narrador se siente prisionero en su casa y termina odiándolas.
Don Pedro
Es el patrón de la pulpería “La Blanqueada”. Es amable y ayuda al narrador comprándole los bagres que este pesca en el río. Según el narrador, es el "pulpero más gaucho del mundo" (p. 234).
Burgos
Es un hombre pendenciero y violento, sobre todo cuando está ebrio, que frecuenta la pulpería "La blanqueada".
Goyo López
Es un conocido del narrador que trabaja en la estancia de Galván. Es un hombre discreto. Es él quien presenta al protagonista ante sus patrones para que obtenga un trabajo en la estancia. Participa del primer arreo del narrador. Es baquiano y hábil para carnear reses.
Don Jeremías
Es el mayordomo de la estancia de Galván. Se lo describe como un "inglés acriollado" (p. 45). Es quien le da las primeras tareas al narrador cuando comienza a trabajar en el lugar.
Don Leandro Galván
Es el patrón de la estancia a la que el narrador se dirige luego de escapar de la casa de sus tías. Años después, será su tutor, cuando el protagonista reciba de él la noticia de la muerte de su padre.
Pedro Barrales
Es un peón de la estancia de Galván. Viaja junto al narrador en su primer arreo. Es un hombre alegre, y el protagonista siente afecto por él.
Valerio
Es un empleado de la estancia de Galván. Es el capataz del primer arreo en que participa el narrador.
Horacio
Es un peón de la estancia de Galván y viaja junto al narrador durante su primer arreo.
Aurora
Es una joven que vive en las cercanías de la estancia de Galván, por la cual el narrador siente atracción. Es morena, de contextura física pequeña y tiene ojos anchos.
Perico
Es un paisano que participa en uno de los arreos que realizan Don Segundo Sombra y el narrador.
Oficial de policia
Es quien detiene a Don Segundo Sombra en el pueblo de Navarro por haber pasado al galope frente a la comisaría.
Comisario
Trabaja en la comisaría del pueblo de Navarro. Es obeso y tiene bigotes. Es autoritario.
Hombre de la feria
Es un anciano de barba blanca, petiso y charlatán, conocido de Don Segundo. Lo contrata a él y al narrador para un arreo de seiscientos novillos.
Pastor Tolosa
Es un antiguo amigo de Don Segundo, con quien este se encuentra en la feria de Navarro.
Sixto Gaitán
Es el encargado de una estancia en la que el narrador y Don Segundo descansan, durante el arreo del ganado hacia la costa. Es un hombre seco y arrugado. Un sueño premonitorio le anticipa la muerte de su hijo.
Joven compañero de arreo
Es un muchacho de unos veinte años con quien el narrador comparte un trayecto del viaje durante un arreo. Es alto, aindiado y lampiño.
Patrocinio Salvatierra
Es un joven de unos veinte años que realiza parte del viaje de un arreo junto al narrador. Es rubio y flaco. Desarrollan una amistad tras varios días de trabajo juntos. Es hermano de Paula.
Paula
Es la hermana de Patrocinio Salvatierra. Cuida del narrador cuando él está quebrado. Es diligente, risueña y coqueta. El narrador siente atracción por ella.
Don Candelario
Es el dueño de la casa donde el protagonista permanece un tiempo para recuperarse de su quebradura.
Doña Ubaldina
Es la esposa de Don Candelario.
Fabiano
Es un peón que vive en la casa de Don Candelario.
Tres mujeres
Viven en la casa de Don Candelario. Son ariscas y carecen de gracia.
Numa
Es un joven que vive en la casa de Don Candelario. Es torpe y carece de gracia. Intenta conquistar a Paula y se mofa del protagonista.
Hombre herido
Un hombre que se cae de su caballo en el rodeo y se lastima la pierna izquierda.
Curandera
Es una anciana que diagnostica y asiste a los lesionados en la casa de Don Candelario.
Don Juan
Es un hombre joven que le encarga al narrador un trabajo de doma en su estancia. Tiene buen trato y es generoso.
Antenor Barragán
Es un muchacho grande y delgado. Su cara es morena, fina y alegre. Es ágil y fuerte, y tiene fama de visteador invencible. Entabla una amistad con el protagonista.
Forastero
Es un hombre de unos cincuenta años que se enfrenta en un duelo con Antenor. En el enfrentamiento resulta mortalmente herido.
Demetrio
Acompaña al protagonista en su último arreo. Es muy grande y fuerte. Cae desmayado tras varias jornadas de trabajo intenso.
Raucho
Es hijo de Don Leandro Galván. Es un hombre fuerte, simpático e inteligente. Es aficionado a la lectura y entabla una amistad con el protagonista.