Jim Hawkins
Hijo del dueño de la hostería «Almirante Benbow», es un adolescente obediente y educado. Trabaja ayudando a su madre en el establecimiento hasta que se suma a la expedición en busca del tesoro perdido. En esta aventura, se muestra como un personaje impulsivo y desobediente, pero muy sensible y valiente, capaz de enfrentar a piratas de larga trayectoria. Cumple la tarea de narrar gran parte de la novela.
John "el Largo" Silver
Es el encargado de la cocina en el viaje a la Isla del Tesoro pero, en realidad, es el líder de la banda pirata. A pesar de que le falta una pierna, es dueño de una fuerza física y emocional notable. Es un personaje complejo, lleno de matices, ya que, si bien es ambicioso y desleal, también es amable con Jim y se siente identificado con el joven. Es el dueño del loro apodado Capitán Flint.
El doctor Livesey
Es el médico de la expedición. Sabio y pragmático, es una figura de respeto para Jim. Justo e imparcial, trata a los piratas como a cualquier ser humano, con cuidado y dedicación, y les ofrece cura y tratamiento para sus dolencias. Es el narrador de parte de la novela, y describe minuciosamente los hechos ocurridos con una mirada científica.
El 'squire' Trelawney
Noble de la localidad de Bristol, Trelawney es el encargado de organizar el viaje a la isla para encontrar el tesoro. Por su autoridad cívica y poder, es quien contrata a los marineros necesarios para la expedición. Sin embargo, esta pésima decisión demuestra que su conocimiento sobre el mundo marítimo es limitado: la tripulación que elige para acompañarlos son unos sanguinarios piratas.
El capitán Smollett
El capitán del viaje a la Isla del Tesoro es comprensivo y perspicaz, ya que desconfía con buenos motivos de la tripulación contratada por Trelawney. Profesional en su trabajo, se toma en serio su tarea de líder y no tolera actitudes indisciplinadas. Así, no le gusta la desobediencia de Jim y le advierte que nunca volverá a embarcarse con él en una misión.
Ben Gunn
Es un ex-pirata que fue abandonado en la Isla del Tesoro por tres años y debe sobrevivir solo allí. Formaba parte de la tripulación del capitán Flint. Al encontrarse con Jim, promete ayudarlos si le ofrecen la posibilidad de volver a tierra firme. Así, se encarga de salvar el tesoro de Flint y lo guarda para compartirlo con el resto del grupo.
Billy Bones
Es un viejo marinero que vive en la hostería de la familia Hawkins. Tiene un aspecto físico muy particular, lleno de cicatrices, y es malhumorado y rudo. Contrata a Jim para que le advierta sobre la presencia de un hombre de una sola pierna, y así involucra al muchacho en la vida pirata. A pesar de que es tramposo y aficionado al alcohol, es gentil y paternal con Jim Hawkins. Muere de un paro cardíaco al principio de la novela.
Pew
Es un mendigo anciano y ciego que llega a la hostería de la familia Hawkins para hostigar a Billy Bones y conseguir el mapa del tesoro. Violento y agresivo, muere atropellado por un caballo.
Israel Hands
El timonel de la embarcación es un experimentado y cruel pirata. Asesina a otro de los guardias y deja su cuerpo abandonado. Es el primer personaje que Jim mata, pero el muchacho no siente remordimiento alguno.
Tom Redruth
Es empleado del squire Trelawney y decide acompañarlo en la misión a la Isla del Tesoro. Es el primero en morir, asesinado por los piratas.
Abraham Gray
Es el único marinero que permanece leal a la tripulación del capitán Smollett, a pesar de la influencia de sus compañeros piratas. Así, recibe parte del botín.
Perronegro
Pirata y viejo adversario de Billy, Perronegro visita inesperadamente a Bones y le advierte que los otros piratas saben de su paradero.
El señor Dance
El superintendente se encarga de perseguir a los piratas que invaden la hostería de la familia Hawkins.
La señora Hawkins
Es la madre de Jim y encargada de manejar la hostería "Almirante Benbow" luego de la muerte de su marido. Es el único personaje femenino y aparece brevemente al comienzo de la novela, para encargarse de que Billy Bones pague las deudas de su hospedaje.
Dick Johnson
Convencido por John Silver de convertirse en pirata, Dick Johnson es el más joven de los rufianes. Inexperto y débil, es abandonado en la isla a su merced, enfermo.
El señor Arrow
A diferencia del capitán Smollett, Arrow es un piloto indisciplinado, incapaz de controlar al resto de la tripulación. Finalmente desaparece, y su muerte permite que Job Anderson e Israel Hands tomen su puesto y queden evidenciados como líderes piratas.
Job Anderson
Contramaestre del barco, se encarga de las tareas del señor Arrow luego de su misteriosa desaparición. Así, se posiciona como uno de los líderes de la banda de los piratas y se enfrenta a Jim, a quien casi asesina con su espada. Afortunadamente, Jim resbala y cae, y Abraham Gray mata a Anderson antes de que este pueda matar al muchacho.
O'Brien
Es el pirata de gorro rojo que forma parte del primer ataque a la empalizada de los hombres del capitán Smollett. Finalmente, es asesinado por su compañero Israel Hands.
George Merry
Uno de los piratas de John "el Largo" Silver, intenta quitarle el liderazgo y matarlo al descubrir que el tesoro fue robado.
Tom
Este joven marinero es asesinado por John Silver por haberse negado a formar parte del bando de los piratas. Jim es testigo de este salvaje acto.
