Ismael
Narrador de la novela. Es un simple marinero del Pequod que emprende el viaje porque siente un gran afecto por el mar. Se propone a sí mismo como un hombre común pero, al mismo tiempo, misterioso. Su función en el argumento de la narración es observar los conflictos que lo rodean y describir las acciones y personalidades de sus compañeros de tripulación. Sin embargo, tiene rasgos y visiones muy significativos. Por ejemplo, idealiza al cachalote y lo considera un animal majestuoso. A su vez, está involucrado en la única relación afectiva personal importante de la novela, la que mantiene con Queequeg, a quien adora. Llega a describir su vínculo como si fuera un matrimonio. Ismael es el único sobreviviente después de que Moby-Dick destruye el Pequod, y por eso puede narrar los sucesos.
Queequeg
Arponero indígena nacido en Nueva Zelanda. Es el hijo de un rey en su aldea natal, pero renuncia al trono para viajar por el mundo en barcos balleneros y aprender de la sociedad cristiana. Conoce a Ismael al comienzo de la novela, cuando ambos deben compartir una cama en la posada de New Bedford. Luego, ambos viajan juntos a Nantucket, y allí se embarcan en el Pequod. Queequeg combina características típicas de los "salvajes" y comportamientos "civilizados". Su apariencia (tiene la piel oscura y llena de tatuajes) hacen que el narrador lo considere un bárbaro y al principio cree que puede ser peligroso. Sin embargo, a medida que lo conoce, descubre en él muchos valores de la sociedad cristiana "civilizada", como la nobleza, la valentía y la cortesía. Es un personaje en permanente transición. Hacia el final de la narración contrae una enfermedad muy grave, pero repentinamente se recupera. El vínculo entre Ismael y Queequeg es el más sólido, afectivo e íntimo de la novela; son compañeros cercanos, se deben mutua lealtad, e incluso se describen como un "matrimonio".
Ahab
Capitán del Pequod. Es un hombre viejo, de unos sesenta años, de carácter serio, retraído y tosco. Desde sus dieciocho años ha estado constantemente en el mar; no ha pasado un año en tierra firme durante cuatro décadas. Hacia el final de la obra, sabemos que tiene una esposa muy joven y un hijo, pero la relación con su familia no es demasiado significativa. Toda la novela tiene como eje el viaje de Ahab como persecución del gran cachalote Moby Dick para vengarse, pues le ha quitado la pierna en un combate previo. El capitán usa una pierna postiza hecha de marfil. Es un hombre severo e imponente, su tripulación le teme y respeta sus órdenes en las travesías a bordo, incluso cuando toma decisiones peligrosas. Se trata de un hombre gobernado apenas por sus impulsos humanos y completamente sujeto a su obsesión con vengarse de la ballena. También es presentado como una figura espectral, como un fantasma; de hecho, pasa mucho tiempo recluido en su cabina, mientras los demás no pueden verlo. Justo antes de encontrarse con la legendaria ballena, se declara a sí mismo inmortal, acompañado de Fedallah, figura siniestra y con rasgos diabólicos. Ahab es blasfemo y no responde a los valores cristianos que Ismael parece defender.
Starbuck
Primer oficial del Pequod. Es un hombre cuáquero originario de Nantucket. Es delgado y tiene un modo pragmático de enfrentar el trabajo a bordo. En varios episodios demuestra estar convencido de la vulnerabilidad y la fragilidad humanas, pero también es un idealista y un optimista que cree que es posible contener esa fragilidad. Es el único que se opone directamente a Ahab cuando el capitán toma decisiones extremadamente peligrosas para el barco y su tripulación. Intenta hacerlo entrar en razón porque percibe que la obsesión de Ahab lo ha llevado a una misión suicida. La hostilidad entre ambos es explícita, pero se mantiene relativamente controlada. Justo antes del encuentro fatal con Moby Dick, Starbuck tiene la posibilidad de asesinar al capitán y salvar las vidas de toda la tripulación, pero se conmueve y termina por mantenerse leal. Es un personaje con un abanico amplio de emociones, que provocan empatía de los lectores.
Stubb
Segundo oficial del Pequod. Es nativo de Cape Cod, tiene un carácter despreocupado y por momentos oculta sus verdaderas opiniones y creencias. Es gracioso incluso al enfrentar la imponencia de Ahab, y se atreve a hacer un chiste sobre su pierna. Aunque nunca tiene una actitud seria, Stubb es un cazador de ballenas muy competente: gracias a su buen humor logra alentar a su equipo sin parecer dictatorial. Es él quien logra matar la primera ballena de esta travesía del Pequod. Sin embargo, no se lo presenta como un personaje idealizado: tiene características positivas, pero también negativas, ya que planea y ejecuta el engaño al barco francés Rose-bud para robar ballenas de las que pueden obtener ámbar gris.
Flask
Tercer oficial del Pequod. Desarrolla un papel mucho menor que Starbuck y Stubb en la novela. Es originario de Martha's Vineyard y tiene una actitud combativa hacia las ballenas. Se lo presenta como un hombre cuyo apetito no puede ser satisfecho jamás; está cada vez más hambriento.
Pippin
También llamado por su apodo, Pip. Es un joven negro que forma parte de la tripulación del Pequod. Es muy temeroso y en una oportunidad se asusta tanto al subir una ballena al barco que se tira al océano, se enreda con la soga que sostiene a la ballena y, para salvarlo, deben cortar la cuerda y perder al animal. Si bien Stubb le recuerda con severidad que no debe tirarse al agua, el joven vuelve a hacerlo y esa vez solo se salva gracias a otro barco que se encuentra en la zona y lo rescata. Tras ese episodio traumático, Pip pierde la cordura. Hacia el final del texto, Ahab descubre que el chico está loco y lo toma como su protegido, pues cree que son iguales en la locura y que pueden salvarse mutuamente.
Fedallah
Es uno de los "fantasmas subalternos" que componen el equipo especial de Ahab para cazar ballenas en su propio bote. Es un hombre de origen oriental, pero no se especifica con claridad de dónde viene. El narrador y algunos personajes se refieren a él varias veces como el "parsi", es decir, proveniente de algún territorio de la antigua Persia. Se mantiene como un misterio oscuro para toda la tripulación hasta el final. Algunos rumorean que es el diablo disfrazado de hombre y que tiene una cola escondida en el pantalón. Creen que Ahab ha hecho un pacto con él, le ha vendido el alma. Se mantiene muy cerca del capitán; analizan sus sueños sobre coches fúnebres juntos y los interpretan como un presagio del fin de Moby Dick. Juran matarla. En el segundo día de cacería del gran cachalote muere ahogado tras enroscarse con una estacha.
Padre Mapple
Célebre cura y antiguo arponero que ha abandonado la navegación para dedicarse al sacerdocio. Es conocido por su honestidad y santidad; tiene una gran reputación en New Bedford. Antes de embarcar en el Pequod, Ismael escucha un sermón en que el padre Maple reflexiona sobre el relato de Jonás y la ballena, sobre la verdad y la falsedad.
Peleg
Marinero retirado y anterior capitán del Pequod. Es dueño del Pequod junto a Bildad. Ambos son "cuáqueros combatientes", cazadores sanguinarios de ballenas. Peleg es el primer personaje que presenta a Ahab y su tenebroso conflicto interno: le cuenta a Ismael que una ballena le ha destrozado la pierna y compara al obsesionado capitán con un antiguo y cruel rey llamado del mismo modo.
Bildad
Es el otro dueño del Pequod. También es un "cuáquero combatiente". Se lamenta por no emprender el viaje a bordo de la embarcación al verla partir.
Elías
Es un desconocido que Ismael y Queequeg se cruzan por la calle en Nantucket antes de partir en el Pequod. Les hace algunos comentarios breves y misteriosos sobre el capitán Ahab. También les dice que viajar en ese barco es como venderle el alma al diablo. El narrador no logra descifrar con nitidez estas palabras, pero le inspiran un poco de temor, pues cree que pueden ser malos augurios.
Tashtego
Miembro de la tripulación del Pequod. Es un indígena estadounidense de Martha's Vineyard que se convierte en el arponero de Stubb.
Daggoo
Miembro de la tripulación del Pequod. Es un hombre negro y de gran tamaño. Ha nacido en África. Se convierte en el arponero de Flask.
Buñuelo
Camarero del Pequod. Sirve las comidas para la tripulación. Se siente nervioso al lidiar con Queequeg y con Tashtego.
Perth
Herrero del Pequod. Diseña y forja un arpón especial con el que Ahab pretende matar a Moby Dick.
Mayhew
Capitán del Jeroboam, un barco de Nantucket que el Pequod encuentra en altamar y que ha sido víctima de un motín provocado por un shaker. Cuando ambos barcos se cruzan, hay una epidemia entre los miembros de la tripulación del Jeroboam, por lo que se comunican desde lejos.
Derick De Deer
Capitán del barco alemán llamado Virgen. Le ruega a Ahab un poco de aceite, pero este se niega. Luego compiten por cazar un cachalote.
Dr. Bunger
Cirujano del barco inglés llamado Samuel Enderby. Le advierte a Ahab sobre el gran peligro que significa enfrentarse a Moby Dick. Se pregunta si Ahab está en su sano juicio.
Gardiner
Capitán del Rachel. Le ruega a Ahab que lo asista en la búsqueda de su hijo, que puede estar perdido en el océano. Aporta información sobre Moby Dick, que se encuentra en la misma zona del mar. Este barco rescata a Ismael cuando el Pequod se ha hundido y le permite contar esta historia como el único sobreviviente del enfrentamiento con el legendario cachalote.